尊龙凯时医学助力客户登顶《Immunity》：揭秘肺部共生真菌诱发肺纤维化的新机制
肺纤维化（Pulmonary Fibrosis, PF）是一种以肺间质举行性瘢痕形成为特征的致死性呼吸系统疾病 ，其细胞外基质的太过沉积会严重损害患者的肺部结构与呼吸功效。既往研究批注 ，肺泡巨噬细胞（alveolar macrophages, AMs）的异� ；罨谙宋⑸ぶ惺┱挂ψ饔� ，可通过增进成纤维细胞增殖与活化 ，加速病理历程。
C型凝集素受体（C-type lectin receptors, CLRs）主要表达于髓系细胞外貌 ，是调控肺部免疫应答的主要模式识别受体。其中 ，Dectin-1（基因：CLEC7A）作为识别真菌β-葡聚糖的要害模式识别受体 ，在肺部抗真菌免疫中占有主要职位。肠道共生真菌已被证实可影响炎症反应 ，然而肺部常驻共生真菌群落在PF爆发生长中所饰演的详细角色 ，仍知之甚少。特殊是 ，肺部共生真菌是否通过Dectin-1介导AMs爆发免疫代谢重编程 ，从而驱动其向促纤维化表型转化 ，这一机制链条尚缺乏系统性研究。
尊龙凯时医学科研团队协助深圳市儿童医院研究团队系统剖析了真菌微生态与免疫代谢互作在肺纤维化中的调控作用。该研究以《Dectin-1 facilitates lung fungal-mediated pulmonary fibrosis》为题揭晓于国际期刊《Immunity》 ，为明确PF的免疫机制提供了新的理论依据。
一、焦点发明与机制概述
研究团队取得了突破性发明：肺部共生真菌是推动肺纤维化的主要“幕后推手” ，而Dectin-1则是要害的“信号放大器”！
焦点机制概述：在肺纤维化爆发时 ，一种特定的肺部共生真菌（Engyodontium）通过团结AMs外貌的Dectin-1受体 ，激活了下游的Raf1信号通路（值得注重的是 ，这一历程竟然绕过了经典的CARD9通路）。这一信号级联反应促使原本处于“静息状态”的AMs爆发“黑化” ，转变为促纤维化表型（大宗渗透Arginase-1和TGF-β）。这些促纤维化因子随后激活了成纤维细胞 ，最终导致严重的肺纤维化。
研究结论示意图
二、研究思绪
三、研究历程与实验效果剖析
1.临床征象与基因敲除验证：Dectin-1是纤维化的“爪牙”
为系统评估CLRs在肺纤维化中的作用 ，研究者首先剖析了人类IPF患者scRNA-seq数据（GSE157691） ，发明CLEC7A在CLRs家族中表达最为显著 ，并特异性富集于AMs。其表达不但在IPF肺组织中显著上调 ，还与AMs标记基因MRC1及多种胶原和纤维化相关基因呈正相关关系。在博来霉素（BLM）诱导的小鼠肺纤维化模子中 ，Clec7a在静息及活化AMs中均显着升高 ，并与纤维化相关基因表达谱一致。功效研究批注 ，Dectin-1缺失（Clec7a?/?）可显著缓解BLM诱导的肺纤维化 ，体现为生涯率提高、胶原沉积镌汰及组织结构损伤减轻。转录组与单细胞剖析进一步展现 ，Clec7a缺失抑制了促纤维化AMs相关基因表达 ，同时下调TGF-β信号通路及细胞外基质相关基因集。分选AMs效果亦证实Arg1和Tgfb1表达降低。这提醒Dectin-1在肺纤维化历程中施展要害调控作用。
图 Dectin-1敲除显著逆转肺纤维化历程
2.细胞运气追踪：Dectin-1驱动巨噬细胞“促纤转化”
scRNA-seq和巨噬细胞转移实验展现 ，在纤维化历程中 ，静息状态的肺泡巨噬细胞需要依赖Dectin-1信号 ，才华“转型”为高表达Arginase-1和TGF-β的促纤维化巨噬细胞。若是使用Dectin-1拮抗剂（Laminarin） ，则能有用阻断这一恶性转化。
3.揪出要害通路：依赖Raf1 ，而非CARD9
既往研究普遍以为 ，Dectin-1主要通过经典的CARD9通路介导下游信号转导。然而 ，本研究通过基因敲除验证发明 ，Card9缺失并未显著影响BLM诱导的肺纤维化历程 ，提醒其在该疾病中的作用有限。相较之下 ，Dectin-1的另一下游分子Raf1在纤维化调控中施展要害作用：无论接纳Raf1抑制剂GW5074干预 ，照旧在巨噬细胞中选择性敲除Raf1 ，均可显著减轻体重下降、胶原沉积及促纤维化基因表达 ，且该效应依赖于Dectin-1保存。别的 ，巨噬细胞耗竭与回输实验 ，以及与成纤维细胞的体外共作育研究进一步批注 ，阻断Dectin-1-Raf1信号轴可抑制成纤维细胞活化及纤维化相关基因表达。这些效果批注 ，在肺纤维化配景下 ，Dectin-1主要通过一条CARD9非依赖、Raf1依赖的非经典信号通路施展作用 ，从而修正了既有认知 ，并展现了新的要害调控机制。
图 锁定Raf1！非经典通路的全新发明
4.锁定真凶：揪出肺部特异性共生真菌
为明确Dectin-1的功效性配体泉源 ，研究者首先通过抗真菌药物氟康唑（FCZ）扫除小鼠肺部真菌 ，发明可显著缓解BLM诱导的肺纤维化 ，包括体重下降减轻及促纤维化因子表达降低 ，而该效应在Clec7a?/?小鼠中消逝 ，提醒真菌作用依赖Dectin-1信号通路。进一步团结Dectin-1-Fc融合卵白“垂纶”战略与ITS测序剖析 ，判断出肺部共生真菌Engyodontium sp.可作为要害配体泉源。功效验证批注 ，将该真菌重新定植于小鼠肺部后 ，可显著加重纤维化表型 ，且该效应依赖Dectin-1-Raf1信号轴 ，在Dectin-1缺失配景下不再泛起。
图 破案了！肺部共生真菌Engyodontium sp.现出真相
5.临床转化验证：在人类IPF样本中重现机制
在机制研究基础上 ，作者进一步在人类IPF样本中验证Dectin-1信号的临床相关性。组织学与免疫荧光效果显示 ，纤维化区域中DECTIN-1?CD206?AMs显著富集 ，并与α-SMA?成纤维细胞细密接触 ，且DECTIN-1与RAF1在空间上共定位 ，提醒该通路在人体内处于活跃状态。单细胞转录组与拟时序剖析展现 ，MRC1hi AMs逐步向SPP1?等促纤维化亚群转化 ，且CLEC7A与TGFB1表达呈正相关。功效上 ，IPF患者BAL细胞上清可显著诱导成纤维细胞中ACTA2、COL1A1等基因表达 ；Dectin-1激动剂Curdlan进一步增强该效应 ，而拮抗剂Laminarin或Raf1抑制剂GW5074则可有用阻断。体外实验亦证实 ，激活Dectin-1-Raf1通路可增进人源AMs获得促纤维化表型。
图 回归临床：在人类IPF患者中获得完善印证
四、优势与立异点
本研究首次明确“肺部局部共生真菌”在肺纤维化爆发中的要害驱行动用 ，将研究视角拓展至肺部微生态 ，富厚了对疾病爆发气制的整体熟悉。
机制立异
发明了Dectin-1在肺纤维化历程中并非依赖经典的CARD9通路 ，而是通过一条“CARD9非依赖、Raf1依赖”的非经典信号通路施展作用 ，从而拓展了CLRs信号转导网络的理论系统。
转化潜力明确
在机制剖析的基础上 ，研究进一步提出了可行的干预偏向 ，包括抗真菌治疗、Dectin-1拮抗剂（如Laminarin）以及Raf1靶向抑制剂等 ，为现在缺乏有用治疗手段的肺纤维化提供了具有潜力的全新治疗战略。
